Учебная работа № 56090. Курсовая Применение спектрофотометрического метода для анализа биологически активных веществ

Выдержка из похожей работы

Испытание на
подлинность лекарственных веществ, В
основе этой стадии фармацевтического
анализа лежат следующие приемы:
а) нахождение в
спектре λmax
и λmin
, характеризующих
области максимального и минимального
поглощения;
б) вычисление
отношения значений оптических плотностей
исследуемого раствора при разных длинах
волн;
в) характеристика
интенсивности поглощения по величине
удельного показателя (Е);
г) сравнение спектра
анализируемого вещества со спектром
стандартного образца этого же вещества,
Во всех случаях
необходимо получение спектра в условиях,
приведенных в НД – растворитель,
концентрация, интервал длин волн, размер
(толщина) кюветы,
Для случая (а) в
полученном спектре находят λmax
и λmin,
сравнивают
с такими же характеристиками, приведенными
в НД – при идентичности веществ оба
значения должны совпадать (табл,7),
Удобным приемом при
испытании на подлинность является
определение отношения величин поглощения
при двух максимумах, Это уменьшает
влияние переменных характеристик
прибора на испытание и исключает
необходимость использования стандартного
образца, Такой способ используют в
случае анализа натрия пара-аминосалицилата
натрия
Таблица 7Характеристика уф-спектров, используемая при идентификации некоторых лекарственных веществ в фармакопейном анализе

№ п/п
Лекарствен-ное
вещество
Концентрация
и растворитель
Характеристика,
используемая для идентификации

1
2
3
4

1
Амлодипина
бесилат
0,005%
в 1% растворе 0,1 М HClв
метаноле
λmax
= 360 ± 2нм; Е=
113-121

2
Аминазин
0,0005%
в 0,01 М HCl
λmax
= 254±2нм, 307±2нм

3
Анестезин
0,0005%
в 0,1 М NaOH
λmax
= 281±2нм; λmin
= 238±2нм

4
Верапамила
гидрохлорид
0,002%
в 0,01 М HCl
D229
= 0,61 – 0,64D278= 0,23 – 0,24

5
Дексаметазон
0,001%
в 95% спирте
λmax
= 240±2нм;D240нм/D263нм= 1,9 – 2,1

6
Дибазол
0,002%
в 95% спирте
λmax=244±2нм,
275±2нм, 281±2нм;λmin=230±2нм,
259±2нм, 279±2нм;приведен
рисунок спектра

7
Димедрол
0,05%
в 95% спирте
λmax=253±2нм,
258±2нм, 264±2нм;λmin=244±2нм,
255±2нм, 263±2нм

8
Дротаверина
гидрохлорид
0,0015%
в 0,1 М HCl
λmax=241±2нм,302±2нм,353±2нм;λmin=223±2нм,262±2нм,322±2нм

9
Зопиклон
0,001%
в 0,1 М HCl
λmax=303±2нм;D303=0,340-0,380

10
Камфора
0,0006%
раствор 2,4-динитрофенилгидразона
камфоры в 95% спирте этиловом
λmax=
231±2нм, 265±2нм;плечо
в области от 273 нм до 277 нм

11
Кислота
аскорбиновая
0,001%
в буферном растворе с рН 7,0
λmax=265±2нм

12
Кислота
никотиновая
0,002%
в 0,1 М NaOH
λmax=258±2нм,
264±2нм, 270±2нм; λmin=240±2нм;в
области от 240нм до 256нм наблюдаются
два неидентифицированных плеча

13
Кислота
фолиевая
0,001%
в 0,1 М NaOH
Полное
совпадение со спектром ГСО в области
от 230 до 380 нм

14
Нитроксолин
0,0005%
раствор в смеси 95% спирт – буферный
раствор с рН 9,18 (98:2)
λmax=249±2нм,
341±2нм,452,5±2нм;
два
плеча в области от 228нм до 238нм и от
258нм до 268нм

15
Офлоксацин
0,001%
в 0,1 М HCl
λmax=
226±2нм, 295±2нм;λmin=
265±2нм

16
Папаверина
гидрохлорид
0,0025%
в 0,01 М HCl
λmax=
285±3нм, 309±2нм;λmin=
289±2нм

17
Пирацетам
1%
водный раствор
Не
имеет выраженных максимумов поглощения
в области от 230нм до 350нм

18
Прогестерон
0,001%
в 95% спирте
λmax=
241±2нм; Е=
518-545

1
2
3
4

19
Ранитидина
гидрохлорид
0,01%
водный раствор
λmax=
229±2нм; 315±2нм;D229нм/D315нм= 1,01 – 1,07

20
Сульфа-диметоксин
0,000015%
в NaOH0,000015%
в HCl
Спектр
щелочного раствора препарата, снятый
относительно кислого раствора имеет
λmax=253±2нм, 268±2нм;λmin=
260±2нм;Спектр
кислого раствора препарата, снятый
относительно щелочного раствора,
имеет λmax=288±2нм

21
Тамоксифена
цитрат
0,002%
в метаноле
λmax=237нм,
275нм

22
Фамотидин
0,0025%
в фосфатном буфере
Полное
совпадение со спектром РСО в области
от 230нм до 350нм

23
Фуразолидон
0,0015%
в ДМФА
λmax=260±2нм,
367±2нм;λmin=302±2нм

24
Фурацилин
0,0006%
в ДМФА
λmax=260±2нм,
375±2нм;λmin=306±2нм

При испытании на
подлинность часто рекомендуется
рассчитать Ев максимуме поглощения (например, для
левомицетина, адреналина, прогестерона)
или сравнить найденное значение
оптической плотности в определенном
диапазоне длин волн со значениями,
приведенными в НД, Так спектр поглощения
раствора пиридоксина гидрохлорида в
фосфатном буферном растворе (рН = 6,9) с
концентрацией 0,5 мг/мл в области от 230
до 250 нм имеет максимумы при 254 и 324 нм, а
оптическая плотность при этих максимумах
равна соответственно 0,18 и 0,35,
Некоторые испытания
на подлинность с использованием
УФ-спектрофотометрии требуют применение
стандартных образцов (СО) лекарственных
веществ, В этом случае проба СО должна
быть приготовлена и одновременно
определена в тех же условиях, что и
испытуемое вещество, Так, УФ-спектр
0,0005% раствора этинитэстрадиола в спирте
этиловом должен иметь максимумы и
минимумы при тех же длинах волн, что и
раствор СО одинаковой концентрации,
соответствующие величины поглощения,
рассчитанные на сухое вещество при λmax
= 281 нм не должны отличаться более, чем
на 3%, Такой прием обеспечивает более
достоверные результаты, чем при анализе
спектра только одного исследуемого
соединения,
УФ-спектрофотометрия
является также одним из составных
комплекса спектральных методов
исследования новых биологически активных
веществ, Определенные полосы поглощения
в спектре могут указать на наличие в
структуре этого соединения тех или иных
функциональных групп, фрагментов
структур (хромофоров), Этим объясняется
сходство спектров веществ, содержащих
фенильный радикал, например, эфедрина,
димедрола, атропина, бензилпенициллина,
Они имеют три максимума поглощения:
251, 257 и 263 нм (рис,7),
Лекарственные
вещества, содержащие замещенный
ароматический радикал – адреналин,
морфин, эстрадиол, левомицетин и др, –
имеют в спектре один максимум около 260
нм, сопряженную еноновую систему в
лекарственных веществах из группы
кортикостероидов – около 238 нм (рис